琼脂糖凝胶电泳虽说是分子生物学的入门实验,但实际跑胶时各种难以解释的异常现象层出不穷。本文整理 10 个最高频的故障,按现象、排查、解决的格式呈现,建议收藏备用。

Q1:条带拖尾(smearing)

1. 检查 DNA 是否降解(重新抽提 + 跑原液对照)
2. 上样量是否过大(建议 ≤ 100 ng/band)
3. 改用低 EEO 琼脂糖(如 Radical™ AG1200LE)

Q2:条带呈微笑形(smiling)

1. 电泳槽温度过高,降低电压至 80 V 以下
2. 检查缓冲液是否充足(液面没过胶面 2–3 mm)
3. 用 1× TAE 替代 1× TBE(散热更好)

Q3:条带弯曲(弯曲走样)

1. 胶凝固不均匀,重新微波加热至完全溶解
2. 上样孔破损,改用宽齿梳
3. 电场不均匀,更换电极缓冲液

Q4:出现鬼带(ghost bands)

1. 酶切反应未完全,补加酶继续 37°C 孵育 30 min
2. 引物二聚体,降低引物浓度至 0.1 μM
3. 基因组 DNA 污染,改用柱式纯化

Q5–Q10 涵盖条带弱 / 缺失、上样孔发白、胶不凝固、Marker 不齐、电压异常等,完整版含详细示意图,请下载实验室操作手册。

如问题持续无法解决,智纯生物技术支持可提供远程协助(微信 / 邮件 / 电话 30 分钟内响应)。